久久77777,爱无码在线,一本一本香蕉香蕉视频,天堂在线久久

免費(fèi)咨詢熱線

021-50778506

技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章哪些因素影響了高保真DNA聚合酶的保真度?

哪些因素影響了高保真DNA聚合酶的保真度?

更新時(shí)間:2020-10-22點(diǎn)擊次數(shù):2350
     高保真DNA聚合酶的保真度是指準(zhǔn)確復(fù)制目的模板的結(jié)果。具體來說,這涉及到多個(gè)步驟,包括讀取模板鏈,選擇正確的三磷酸核苷,并將此核苷酸插入3’引物末端的能力。為了區(qū)分正確和錯(cuò)誤的核苷酸,一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。這種“校正”活性可切除不正確摻入的單核苷酸,并將其替換成正確的核苷酸。高保真PCR使用摻入錯(cuò)誤率低且具有校正活性的DNA聚合酶,以保證目的DNA的忠實(shí)復(fù)制。
  在設(shè)計(jì)PCR實(shí)驗(yàn)時(shí),你首先要考慮你的應(yīng)用是否需要高保真聚合酶。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果依賴于正確的DNA序列(如克隆或測序),那么你就要盡量減少錯(cuò)配核苷酸的摻入。而對于普通PCR或菌落PCR,確定擴(kuò)增子是否存在或質(zhì)粒上是否帶有插入片段,那高保真則大可不必。由于某些高保真聚合酶的強(qiáng)勁特性,一些研究人員在所有擴(kuò)增中都使用它們。
  關(guān)于DNA聚合酶的高保真,目前還沒有統(tǒng)一的定義。人們往往與TaqDNA聚合酶比較,來判斷保真度的相對高低。例如,NEB(NewEnglandBiolabs)的科學(xué)家測定Taq聚合酶的錯(cuò)誤率為2.7x10-4±0.8x10-4,或每3700個(gè)堿基1個(gè)錯(cuò)誤。這些數(shù)據(jù)表明,利用Taq以25個(gè)PCR循環(huán)擴(kuò)增400bp的片段,可能一半的克隆都帶有錯(cuò)誤。對于較大的片段如1kb,每個(gè)克隆都可能帶有不想要的突變。相比之下,NEB的Q5超保真聚合酶的錯(cuò)誤率比Taq低100倍。根據(jù)這一數(shù)據(jù),200個(gè)克隆中的199個(gè)將是正確的。

掃碼加微信

服務(wù)熱線

021-50778506

上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄

lsj0027@obiosh.com

Copyright © 2025和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2023007219號-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登錄    sitemap.xml

日韩三级片免费区| 丰满人妻少妇久久久| 熟妇一区二区| 久久激情五月婷婷| 国产精品无码久久久久久app| 天堂二区三区三| 日韩欧美中文字幕成人| 呦香一区二区| 色伊人亚洲综合| 亚洲欧美中文国产| 中文字幕网站| 粉嫩AV.VIP| 久久精品国产亚洲AV无码娇色| 大肉棒一捧一进视频| 久久福利AV| 精品少妇后入一区二区三区| 一区二区三区久久久毛片| 欧美亚洲日韩成人小说| 我美女日B| 幼AV在线| 欧洲亚洲国产91| 日韩无码www..com666| 91粉嫩嫩不卡一区系列免费观看| 美女被日B视颅| 高肉hav一区二区| 99观看少妇高潮| b无码在线| 成人踪合网| 日韩成人AV免费观看| 成人在线免费视频亚洲精品综合| 国产一区二区欧美亚洲另类| 欧美巨屌轮奸日韩美女视频| 中文字幕,自拍偷拍,| 美女黄91| av草色一区| 成人黄色激情视频APP| 国产五月天欧美自拍| 99精品88| 久久乱码综合| 欧美 gu一区二区| 巫山县|