簡要描述:EZ 慢病毒感染增強劑是一種可以增強慢病毒感染細(xì)胞的試劑。本產(chǎn)品在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加多種生長因子、增強因子和微量元素。在病毒感染過程中,既可以增加病毒的感染效率,又可保證細(xì)胞良好的生長狀態(tài)。
產(chǎn)品分類
Product Category詳細(xì)介紹
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AC04L443/AC04L444 |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
產(chǎn)品描述
EZ 慢病毒感染增強劑(下文簡稱“EZ 增強劑")可顯著增強反轉(zhuǎn)錄病毒感染細(xì)胞的效率。僅配方優(yōu)化,本產(chǎn)品進一步提高了細(xì)胞表面唾液酸與病毒顆粒的吸附作用,極大增加了病毒感染細(xì)胞的效率。優(yōu)化配方后,試劑副作用更小,作用劑量更穩(wěn)定,適用細(xì)胞更廣泛。
效果明顯:能顯著增強慢病毒感染效果,有效節(jié)省病毒用量;
適應(yīng)性強:幾乎無細(xì)胞毒性,可適應(yīng)敏感細(xì)胞;
穩(wěn)定性好:產(chǎn)品穩(wěn)定,保存時間長。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
EZ 慢病毒感染增強劑 | AC04L443 | 250uL |
EZ 慢病毒感染增強劑 | AC04L444 | 500uL |
運輸與保存
藍(lán)冰運輸。-20℃保存,有效期12個月。
使用方法
1. 細(xì)胞準(zhǔn)備:以5~8×104cells/孔的密度鋪板,5%CO2培養(yǎng)箱孵育過夜(根據(jù)細(xì)胞生長情況調(diào)整細(xì)胞密度);
2. 病毒感染::
(1) 去除舊的培養(yǎng)基,加入一定量MOI的病毒顆粒(病毒感染時細(xì)胞密度為30%-40%);
注:病毒用量計算方法:(細(xì)胞數(shù)×MOI值/病毒原液滴度)×103=病毒加藥量(μL),培養(yǎng)基的總量必須充分覆蓋細(xì)胞(常用細(xì)胞培養(yǎng)體積見注意事項3);
(2) 加EZ 增強劑:增強劑工作濃度1mg/mL,儲存液濃度100mg/mL,使用EZ 增強劑與培養(yǎng)基體積按1:100比例稀釋使用。如:24孔板500uL體積加入5uL EZ 增強劑。
3. 換液:病毒感染細(xì)胞后8-12h,棄去培養(yǎng)基后每孔加入新鮮的培養(yǎng)基,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng);
4. 細(xì)胞檢測:病毒感染細(xì)胞后72h,檢測基因表達(dá)情況或使用嘌呤霉素篩選培養(yǎng)基替換舊的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)、傳代擴增進行穩(wěn)定株篩選(根據(jù)細(xì)胞密度考慮是否傳代)。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2. 本產(chǎn)品顯著降低了細(xì)胞毒性,僅對部分末端分化的神經(jīng)元細(xì)胞,DC細(xì)胞有輕微毒性,初次使用建議先開展預(yù)實驗。
3. 本產(chǎn)品建議用量終濃度1mg/mL,可根據(jù)感染效率調(diào)整用量,常用細(xì)胞培養(yǎng)體積及試劑用量見下表:
底面積 | 接種體積 | 增強劑用量(µL/孔) | |
96孔板 | 0.3 cm2 | 100 µL | 1 µL |
48孔板 | 0.6 cm2 | 200 µL | 2 µL |
24孔板 | 2 cm2 | 500 µL | 5 µL |
12孔板 | 4 cm2 | 1 mL | 10 µL |
6孔板 | 10 cm2 | 2 mL | 20 µL |
T25瓶 | 25 cm2 | 5 mL | 50 µL |
4. EZ 增強劑和感染效率的關(guān)系:在其他條件固定情況下,增強液用量越大,感染效率越高,一般增強劑的用量可以到推薦用量的1-3倍。但增強劑用量過大,可能導(dǎo)致細(xì)胞毒性。
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